Application de la technique chromogénique au test des endotoxines bactériennes

La technique chromogénique fait partie des trois techniques qui contiennent également la technique du gel-caillot et la technique turbidimétrique pour détecter ou quantifier les endotoxines des bactéries à Gram négatif en utilisant un lysat d'amibocytes extrait du sang bleu du limule (Limulus polyphemus ou Tachypleus tridentatus).Il pourrait être classé comme un test chromogénique à point final ou un test cinétique-chromogénique basé sur le principe de test particulier utilisé.

Le principe de la réaction est le suivant : le lysat d'amibocytes contient une cascade d'enzymes sérine protéase (proenzymes) qui peuvent être activées par des endotoxines bactériennes.Les endotoxines activent les proenzymes pour produire des enzymes activées (appelées coagulase), cette dernière catalyse la division du substrat incolore, libérant un produit pNA de couleur jaune.Le pNA libéré peut être mesuré photométriquement à 405 nm.Et l'absorbance est positivement corrélée à la concentration d'endotoxine, la concentration d'endotoxine pourrait alors être quantifiée en conséquence.


Heure de publication : 29 septembre 2019