Qu’est-ce que le test des endotoxines ?

Qu’est-ce que le test des endotoxines ?

Les endotoxines sont des molécules hydrophobes qui font partie du complexe lipopolysaccharide qui forme la majeure partie de la membrane externe des bactéries à Gram négatif.Ils sont libérés lorsque les bactéries meurent et que leurs membranes externes se désintègrent.Les endotoxines sont considérées comme les principaux contributeurs à la réponse pyrogène.Et les produits parentéraux contaminés par des pyrogènes peuvent entraîner l'apparition de fièvre, l'induction d'une réponse inflammatoire, un choc, une défaillance d'organe et la mort chez l'homme.

Le test des endotoxines est le test permettant de détecter ou de quantifier les endotoxines des bactéries à Gram négatif.

Les lapins sont utilisés dans un premier temps pour détecter et quantifier les endotoxines dans les produits pharmaceutiques.Selon l'USP, le RPT implique la surveillance d'une augmentation de la température ou d'une fièvre après une injection intraveineuse du produit pharmaceutique chez des lapins.Et 21 CFR 610.13(b) exige un test pyrogène sur le lapin pour les produits biologiques spécifiés.

Dans les années 1960, Fredrick Bang et Jack Levin ont découvert que les amibocytes du limule se coagulaient en présence d'endotoxines.LeLysat d'amibocytes de Limulus(ou Tachypleus Amebocyte Lysate) a été développé en conséquence pour remplacer la plupart des RPT.Sur l'USP, le test LAL est appelé test d'endotoxine bactérienne (BET).Et BET pourrait être réalisé en utilisant 3 techniques : 1) la technique du gel-caillot ;2) la technique turbidimétrique ;3)la technique chromogénique.Les exigences du test LAL contiennent un pH, une force ionique, une température et une durée d'incubation optimaux.

Comparé au RPT, BET est rapide et efficace.Cependant, BET ne pouvait pas remplacer complètement RPT.Parce que le test LAL peut être perturbé par des facteurs et il est incapable de détecter les pyrogènes non endotoxines.